Методы оценки жизнеспособности клеток
Оценка жизнеспособности клеток — это ключевая задача в клеточной биологии и биотехнологиях, поскольку она позволяет определить, какое количество клеток остаётся живым и функционирующим после определённых процедур или под воздействием внешних факторов.
Спектрофотометрические методы
Одним из самых распространённых методов является спектрофотометрия, используемая для измерения оптической плотности клеточных суспензий в ультрафиолетовом или видимом спектре. Это позволяет оценивать клеточный рост и выживаемость на основе изменений оптической плотности среды.
Флуоресцентные методы
Флуоресцентные методы включают использование красителей, которые связываются с определёнными компонентами клеток. Например, использование таких красителей, как Hoechst и PI (propidium iodide), позволяет определять количество живых и мёртвых клеток. Высокая специфичность данных методов делает их очень популярными для анализа клеточной жизнеспособности.
Протеиновый анализ
Определение уровней специфических белков методом Вестерн-блоттинга или ELISA также может использоваться для оценки жизнеспособности. Белковые маркеры апоптоза, такие как каспазы, могут свидетельствовать об уровне клеточной смерти.
Методы основанные на активности митохондрий
Митохондриальная активность клеток может быть определена с помощью теста МТТ, который измеряет активность митохондриальных ферментов. Активные митохондрии превращают жёлтый тетразолий соли МТТ в фиолетовый формазан, степень интенсивности окрашивания которого пропорциональна числу живых клеток.
Эти методы обладают своими преимуществами и ограничениями. Поэтому оптимальный выбор метода обычно зависит от конкретных целей исследования и используемых биологических систем.
Ключевые слова: клеточная жизнеспособность, флуоресцентные методы, спектрофотометрия, митохондрии.
Категория: Биология
Теги: клеточная биология, лабораторные методы, биотехнологии